染色缸
用于医i疗卫生、医学院、防疫站、大专院校、科研单位,在研究细菌、细胞时,对涂有痰液、勃液、分泌液、浓汁等细菌标本制片或动植物标本制成的载玻片或盖玻片进行染色时作贮存染色液体,浸胞载玻片或盖玻片的染色器具。
造型:染色缸,它的造型分为方形、圆形、小型圆形三种。方形:是一只偏长方形的玻璃缸,缸内壁两侧有十对凹凸槽,用来插放10 片25.4mm*76mm 的载玻片用。缸的上面有一只四边凸出的平面玻璃盖,染色缸玻璃,用以与缸的上边沿相配,防止灰尘污染。
圆形:是一只口为圆形,玻片染色缸,体为长方形垂直宽底的玻璃缸,缸内体积亦是长方形,壁的两侧有5 对对称的凹凸槽,是用以直立插放25.4mm*76mm 的载玻片。缸的上口有一圆平面玻璃盖,染色缸,用来防止灰尘污染。
小型圆形:是一只矮小的、圆口、圆底、方体的玻璃缸,缸内壁有四对左右对称的凹凸槽,用于插放涂有标本的24mm 又24mm 的盖玻片用。其它与圆型染色缸相同。
标本的固定原则是:①不能损伤细胞内的抗原;②不能凝集蛋白质;③不能损伤细胞形态;④固定后应保持细胞膜的通透性,以允许抗ti进入与抗原结合。水洗:固定后以冷的0.01Mol/L pH7.4PBS液浸泡冲洗,之后以蒸馏水冲洗,防止自发性荧光。染色:染色分直接染色法与间接染色法。1.材料与试剂:(1)荧光抗ti,稀释至应用浓度。(2) 0.01Mo/L pH7.4PBS液。(3) 9份优甘油加1份pH7.4PBS液即为柑油缓冲液。甘油有减少非特异性荧光的作用。(4)带盖方盘。
制片:选无自发性荧光的石英玻片或普通好的玻片,洗净后浸泡于无永乙醇和乙mi等量混合液中。用时取出用绸布擦净。将待检样品如组织块剪成适当大小印压于玻片上。也可采用冰冻切片或石蜡切片样品。
固定:除研究细胞表面抗原或不稳定抗原可不固定外,一般均应固定。固定的作用有三:①防止标本从玻片上脱落;②除去防碍抗原抗ti结合的类脂,使抗原抗ti结合物易于获得良好的染色结果;③固定的标本易于保存,如组织切片固定后在20°C下可保存一年而不改变其染色特性。
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