华士特脂肪酸定量 检测方法:
1、样品提取
称取适量样品,加入4mL的1醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,摇匀;恒温在30℃以下超声抽提10min。取出离心管,放于离心机中离心(1800rpm,10min),收集上清液,重复3次;将萃取液在柔和氮气流下吹干。
2、萃取液的皂化
加入3mL 6%KOH的1醇溶液(配制:6gKOH/1醇118mL左右),超声10min,放置30min,重复3次,室温放置过夜(瓶盖盖紧)进行碱水解;加入2mL正己烷,超声10min,摇匀,震荡离心,弃除上层正己烷萃取液,重复3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入约1mL 4N的HCl使pH<2,再用2mL正己烷萃取3次。
3、脂肪酸的衍生化
将上述萃取液,转移到带盖玻璃管中,用氮气吹干后,加入约2mL BF3-MeOH,玻璃管上空间冲入氮气后盖盖密闭,于90℃下加热2h;待样品冷却后,加入5%NaCl溶液约1ml,用2ml正己烷萃取3次,并将萃取液转移到2mL进样瓶中,氮气吹干,待分析。
4、色谱条件
色谱柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25µm
升温程序:80度起始温度,保持1分钟;10度/min升温到200度,5度/min升温到225度,2度/min升温到250度,保持5min。
MS,EI源。
华士特生物提供DHA、ARA、AA等长链脂肪酸及其他短链脂肪酸检测,可检测脂肪酸37种。海洋鱼类是提取DHA的主要来源。海产鱼类特别是中上层鱼类的油脂中含有大量的DHA,如鲔鱼、秋刀鱼、远东沙丁鱼的油中DHA的含量均在10%以上。目前全世界鱼类油脂的年产量在100万吨左右,理论上从中可提取10~25万吨。实际上由于分离技术等因素的限制,鱼的油脂产量要低于上述数字、而且提取的鱼类油脂有相当大的部分被氧化和渗入人造黄油或起酥油中被消耗掉,真正可用于分离DHA的仅占少部分。除此之外还有贝类和甲壳类。
AA即二十碳四烯酸(花生四烯酸),英文名Arachidonic acid。它是人体大脑和视神经发育的重要物质,对提高智力和增强视敏度具有重要作用。AA具有酯化胆固醇、增加血管弹性、降低血液黏度,调节血细胞功能等一系列生理活性。
EPA是二十碳五烯酸,英文名Eicosa-pentaenoic acid。EPA是从鱼类油脂中发现的一种长链ω-3多不饱和脂肪酸。它除了能够软化血管,对很多自身功能问题而引起的疾病,包括气喘、系统狼疮红斑和均有功效。研究表明,EPA能迅速在脑中转化成DHA并蓄积。
华士特生物提供DHA、EPA、AA等脂肪酸定量检测,一次进样可检测37种脂肪酸。
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