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固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、 抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定 液分为醛类固定液、类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、盐类固定液等,较为常用的是醛类中的 、醇类中的乙醇。 尚宝生物 BS固定液(BS fixing solution )主要由、等混合而成,固定后对于细胞核染色固定,尤其适 用于细胞核 DNA 染色的固定。

对不同类型的组织应适当合理地选择固定液。有的固定液对于组织有膨胀作用。固定剂是一种化学试剂,有液体和固体之分,一般使用较多的是液体,而固体固定剂如多聚甲醛,则多用于实验研究的组织固定。固定剂的种类繁多,成份复杂,对组织的作用不尽相同,英国的组织化学Pearse指出:对于每个既定的组织化学方法来说,选择合适的方法是极为重要:在组织化学研究准备阶段不论采用什么固定剂,都必须尽可能确切地知道它们对于各种组织成分的反应基团的效用。Jones(1973),指出理想的固定剂必须具备的条件是,防止渗透损伤和收缩,以达到在各级可见度的水平皆无形态变化;要求组织所有的成分能保留于原位。他认为有三种试剂即甲醛、和丙稀醛接近于达到上述要求。[4]为了更好地把组织中各种成分尽量保存好,尽量好给予显示出来,就决不能千篇一律地使用一种固定液,而必须认真地深入研究各种固定液的性能和使用方法。例如:,它对组织有明显的皱缩,硬化作用,平常它是决不会被用来作固定液的,用它不但太浪费,造价太高,而且也使切片较为困难,但是,对于某些酶的研究,脑组织的固定,某些细胞的培养等。

组织的第二次固定或后固定。在一般的常规病理活检组织中,往往用一种固定液,就能够达到目的,获得满意的结果。但是,对于某些特殊病例光用一种固定液是不够的,必须根据不同的情况,使用特殊的固定液再次将组织固定,或者在切片后染色前再行固定。这种方法称为二次固定或后固定。例如:胚胎性横纹肌肉瘤,由于细胞发育较幼稚,完全不象成熟的横纹肌组织所固有的横纹,在进行特殊染色前,就必须用Zenker氏固定液进行第二次固定,方能较好地显示出横纹肌纤维来。否则,效果不佳。另外,电镜固定的标本,通常都需要后固定。其使用方法是先用固定,再用奥酸固定。

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