等温核酸试剂盒
FAQ
能否进行荧光终点分析?
可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光,荧光增强意味着发生了扩增。
4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?
支持。在RPA反应中,连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。
5跑胶前需要回收RPA产物吗?
需要。RPA反应中的物质会干扰琼脂糖电泳,如果不进行产物回收,跑出来的带会出现拖尾。
核酸试剂盒
样本采集质控重要性
样本采集作为核酸检测的首步,其中涉及的采样耗材和病毒保存液的对检测结果的准确性至关重要,不合格样本会直接影响检验结果。在新冠核酸检测中,不合格样本通常是由于采样问题和采样用具问题导致的。
合格的病毒保存液目前主要要求两点:
1.保证病毒的充分灭活,防止采样、运输和检测过程的风险。
2.保证病毒核酸(RNA)在采集、运输过程中的稳定性,保证检测结果的准确性,防止样本运输保存过程中降解导致检测的“假阴性”。
如何提高扩增曲线的可重复性?
优化扩增曲线考虑以下因素: 对于低拷贝数模板,不稳定扩增可能是因为达到检测限或者是反应混匀程度不同(未混匀的反应扩增效率不佳)。另外,在低温情况下存贮,重组酶和辅助蛋白在50%甘油情况下形成沉淀,也是可能导致不稳定扩增的原因。所以,20x***反应mix在室温下解冻并震荡涡旋将使其成为液体,不影响其功能,并且有效提高扩增效率。不稳定扩增也可能是因为master mix量不足,在加入体系前,用户必须保证震荡后20x***反应组分均一。
目前疑似病例与确诊病例已逾6万例,核酸检测需求量与日俱增。另外,湖北省增加“临床诊断”分类,将疑似病例标准放宽,需要更多保质保量的核酸检测产品投入应用。国家审核批准的新型冠状病毒核酸检测产品大多采取的是“实时荧光RT-PCR检测”方法,RT-PCR需要核酸提取、扩增2个步骤完成,但目前市面上部分注册产品仅有扩增产品,没有核酸提取产品,缺乏系统的核酸检测方案,无法保证核酸检测的系统性、准确性及可靠性,也间接造成了核酸检测遭到社会公众质疑的尴尬局面。因此,当检测产品投入后,可能还需匹配不同厂家的核酸提取试剂,对抗疫工作的开展产生了一定影响。
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