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洋葱亚细胞定位培养-亚细胞定位-思特进科技发展公司

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武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。

本研究旨在通过对根癌农侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,洋葱亚细胞定位公司,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,亚细胞定位,明确In5-2启动子的乙酰类化合物诱导元件的具体位置。在本研究中采用根癌农(A grobacterium tume faciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响。结果显示,在OD600值为0.8的农液中15min,共培养3d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统。同时,构建了含不同长度的玉米(Zeamays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143bp之间。结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析。

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GaMYB2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A 中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图B 中发现GaMYB2-GFP 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,洋葱亚细胞定位培养,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。

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玉米Δ12脂肪酸脱氢酶是催化油酸形成亚油酸的关键酶.将其编码 基因FAD2(GenBank登陆号:DQ496227)到酿酒酵母表达载体pYES2.0中,构建成重组质粒pYE/FAD2,转化到酿酒酵母进行 诱导表达.同时以pYES2.0转化子为对照.气相色谱(GC)分析表明,重组转化子亚油酸...

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