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环境条件
无菌环境：无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活1体内，解1毒系统和免1疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的侵入，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免1疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解1毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。
常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒1素杀1死细胞。真菌的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。
iPS存在的风险
1. iPS 与ES细胞基因表达虽很相似，但iPS细胞存在遗传缺陷．
2. iPS细胞的成瘤性，不同体细胞来源的iPS细胞成瘤性有差异．因此，应选择适当的供体细胞或筛选安全型IPS细胞克服IPS细胞临床cure的成瘤性．
3. iPS细胞及其体外诱导分化细胞的异质性．体细胞重编程不充分(partiallyreprogrammed IPSCs)、筛选标准不严紧和iPS细胞携带供体．细胞的表观遗传记忆和iPS 细胞分化不定向都导致细胞异质性，异质性是导致iPS细胞成瘤的潜在因素
4. iPS细胞体外定向分化细胞的功能与行为研究尚少，尤其在细胞cure上，目的细胞是否会在cure靶位或迁移到非靶位点成瘤，或异位形成组织等是亟待阐明的问题．
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第4年
