灵敏度
通过比较10个B0孔平均光密度值(OD)和10个5号管标准品的平均光密度值,cGMP assaykit,计算出灵敏度。cAMP浓度的检测极限通过标准曲线上0位置的两个标准偏差来测定。
OD(B0平均数) =0.685± 0.003
OD(5号 标准品平均数)=0.604± 0.010
光密度偏差(0-0.4 pmol/mL) =0.081
2 SD's of the Zero Standard =0.006
灵敏度 =081.0006.0/0.8×0.4 pmol/mL =29.6 fmol/mL
cAMP作为的第二信使,可调节细胞对各种外源和内源信号分子的反应。 它主要通过激l活蛋白激酶、控制特定的离子通道、磷酸二酯酶调节细胞环核苷酸浓度以及激l活Epac(通过cAMP直接激l活蛋白交换)(3-6)来调节生理过程。通过腺苷酸环化酶可以实现ATP转化为cAMP。 哺乳动物体内的主要腺苷酸环化酶家族均是横跨膜的,具有9个亚型,且可通过G蛋白Gs或钙离子/钙调素(1)激l活。另外,还有一种可溶性的腺苷酸环化酶,可以通过碳酸盐或Ca2 +调节(7)。目前商业化提供的一些cAMP检测试剂盒主要应用ELISA的方案,使用的是非亲和纯化的cAMP多克l隆抗l体,尽管具有灵敏性,这些多克l隆抗l体与ATP存在一定程度的交叉反应。基于ATP是cAMP生产的底物,很有必要找到一种能高特异性识别cAMP的抗l体。纽斯特生物开发出了鼠单克l隆抗l体的cAMP ELISA 检测试剂盒。该单克l隆抗l体对cAMP的特异性比cAMP、ATP等类似的小分子高出108 倍以上。相较于其他的多克l隆抗l体cAMP试剂盒,纽斯特生物cAMP ELISA试剂盒能显著的提高其灵敏性和特异性,且能有效避免来自动物多克l隆抗l体的批次间差异, 因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。
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