试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张 catalog No.30101
该微孔板将特异性识别小鼠IgG 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6 mL catalog No. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗cAMP的小鼠单克l隆抗l体工作液6 mL catalog No. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意:为了稳定和长效的实验,抗l体储存于-80℃。在使用前将6μL 1000×偶联酶储存液加入到6 mL 稀释缓冲液中配制为工作液,并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 mL catalog No. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 mL catalog No. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. cAMP标准品0.25 mL catalog No. 30203
浓度5000 pmol/ mL
7. 显色底物A,12 mL catalog No. 30107
8. 显色底物B,Mouse cGMP kit, 12 mL。 catalog No. 30108
9. 终止液,6 mL; catalog No. 30110
注意:该溶液有腐蚀性;储存时请旋紧瓶盖
武汉纽斯特生物科技有限公司(d),系美国生命科学试剂供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA试剂盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往世界。
试剂准备非乙酰化cGMP标准品将5000 pmol/mL cGMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#7标记六只洁净试管。移取475μL 0.1M HCl到#1号试管,400μL到#2至#7号试管。加入25μL 5000 pmol/mL cGMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#7管。
经以上操作,#1至#6管中cGMP标准品浓度分别为250,50,10,2,0.4,0.08和0.016 pmol/mL(详见cGMP加样表)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。
标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL 0.1M HCl到NSB管中。
洗涤液将15 mL 10×洗涤液储液加到135 mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至试剂盒有效期限,或者3个月。
试剂盒储存要求本试剂盒所有组分在有效期限内,于4℃稳定保存。为了长效的实验,1000×储液请保存于-80℃。本试剂盒未提供的必需试剂
1. 去离子水或蒸馏水。
2. 浓盐酸。
3. 量程在5μL至1000μL之间的精密移液管。
4. 量程为50μL和200μL的中继移液器。
5. 用于稀释储液的一次性烧杯。
6. 刻度量筒。
7. 微孔板振荡器。
8. 吸水纸。
9. 酶标l仪,可读波长450nm,在570nm至590nm之间应有修正。
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