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PCR实验室管理细则规范:
1、本实验室进行临床基因扩增检测及相关检验工作,不得进行其他实验操作。
2、本实验室采用实时荧光定量PCR技术作为临床基因诊断的主要技术手段,实验室分为四个区:
试剂储存和准备区(一区)、样品标本处理区(第二区)、扩增区(第三区)、扩增产物分析区(第四区)。各工区配备的设备、仪器仪表、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品和专门的工作服,工作服具有明显的识别标志。标本的接收有专门的标本接收处。
3、各工作区专门的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材、清洁用具不得混用。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?常见的三区是指:
1、试剂配制区:PCR反应体系的配制区域。
2、标本处理区:包括扩增模板的制备,即提取DNA的地方。
3、PCR扩增和产物分析区:进行PCR扩增的区域,也是扩增产物进行凝胶电泳分析的区域。
如果将PCR扩增区域和产物分析区再次分开,就是四区隔离。四区隔离,主要目的是防止气溶胶在各个PCR区域之间的流动,好的方法是每个区域隔一幢楼,但操作起来不现实,于是便有了针对不同区域设置正负压的方法。
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PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下:
(1)标准的PCR实验室试剂准备区: 仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。
(2)标准的PCR实验室标本制备区仪器设备主要应有生物安全柜(尽量为B2, 可避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,山西PCR实验室工程厂家,出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。
(3)标准的PCR实验室扩增区主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。
(4)标准的PCR实验室产物分析区:本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、和等。在理想情况下,PCR实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内
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