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武汉科锐诺生物科技有限公司
主营：外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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外泌体分离提取方案。主要方案包括：
1、差速超1速离心法；
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；
2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；
3、超滤提取法；
适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，外泌体电镜检测，做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。
外泌体不仅含有蛋白质抗原，还含有分泌细胞来源的mRNA或non-coding RNA（特别是miRNA），其功能引起广泛关注。外泌体的脂质双分子层膜可保护这些RNA，不被RNase分解，在血液、体液中稳定存在。在外泌体及其分泌细胞中均可检测出RNA，也存在仅能在其中之一检测出RNA的情况，因此我们设想存在一种可以选择性将特定的RNA吸收至外泌体的机制。
进入靶1细胞的外泌体与核内体膜融合，将其运载的RNA释放至靶1细胞的细胞质中。释放出来的mRNA被翻译成蛋白质，而miRNA却抑制靶基因的翻译，因此表明外泌体可以调节靶1细胞内的基因表达。
在免1疫系统中，设想这个机制是遭遇外敌入1侵的免1疫细胞通过RNA向未遭遇入1侵的细胞水平传递自身的活性状态，二者可以共同作为抵御外敌入1侵的一种手段。
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