阻断内源性过氧化物酶:滴加3%1甲1醇-H2O2,室温避光孵育15min,水稻原位杂交测试服务,将玻片置于PBS(PH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次,每次5min。
预杂交:滴加预杂交液,37°C孵育1h。
杂交:倾去预杂交液,滴加含探针has-circ-ST6GALNAC6 probe 杂交液,浓度6ng/ul,恒温箱37度杂交过夜。
杂交后洗涤:洗去杂交液,2×SSC,37°C 洗10min,1×SSC,37°C洗2×5min,0.5×SSC室温洗10min。若非特异杂交体较多,可以增加甲酰胺洗涤。
滴加封闭液:滴加封闭血1清(正常兔血1清),室温30min。
滴加鼠抗地1高辛标记过氧化物酶(anti-DIG-HRP):倾去封闭液,滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育50min,后PBS洗3次×5min。
结1核病是严重威胁人类健康的传1染性疾病,每年约有200万人死于该病,其死1亡率在传1染性疾病中仅低于艾1滋病,随着医1疗诊断技术的迅猛发展,结1核病病理诊断经历了单一形态学和联合特殊染色,到如今利用分子病理基因检测技术进行准确诊断的三个阶段。
我科早在全1国建立了系统性结1核病分子病理诊断技术的平台,率1先将分子病理诊断技术在结1核病中应用并推广,解决了传统病理对菌阴肺结1核及肺外结1核病的诊断率低、结1核病与非结1核分枝杆1菌病无法鉴别以及耐药结1核病无法诊断等难题。同时,我科作为中华医学会结1核病学分会金1牌病理培训基地,负责组织制定了结1核病病理诊断规范、培训了大量的专1业技术人员,为形成结1核病病理学综合诊治新模式做出了卓1越贡献!
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