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武汉科锐诺生物科技有限公司
主营：外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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| 先生： |
NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度，但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先，我们必须理解NTA检测原理：该技术基于布朗运动，通过视频分析颗粒计数，可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此，样本中的所有颗粒，都会被侦测并计入，外泌体粒径检测，而不能筛选出外泌体单独进行计数；同理：也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体；例如下图为常见的粒径浓度分布图，可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内，但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证，譬如：透射电镜、western blot等。
据国际细胞外囊泡学会（ISEV）在2014年的提议，外泌体鉴定3个标志：透射电镜（transmission electron microscope，TEM）、粒径（Nanoparticle Tracking Analysis， NTA）、蛋白标志物（Western Blot， WB）。
外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态，判断样本是否含有外泌体。
外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，可观测样本中是否存在外泌体样结构（通常为茶托型或一侧凹陷的半球形），同时可测量外泌体大小。
检测平台：TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
检测结果：三张透射电镜图片，尽可能体现完整的外泌体形态（如有）
检测周期：10-15个工作日
样本准备
1. 提供外泌体悬液即可，未纯化样本也可以上机检测；
注意：NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度，无法区分外泌体与非外泌体成分；当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记，则可以获知外泌体特定亚群的含量。
2.仪器的检测区间是10^7 particles/ml，且有浓度检测下限，为10^5 particles/ml，进样量不少于2ml；一般来说，会对样本稀释后进样；
我司无法准确建议送样量；检测需要量与样本本身浓度有关，样本浓，则用量小，反之则多，根据检测经验，样本取用量一般在2μl-100μl不等，取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl，如样本珍贵，可联系我司寄回，运费视具体情况收取。
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第2年
