实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。
目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗1体标记的外泌体。
外泌体装载着各种免1疫相关分子,通过这些分子来调节免1疫应答。例如,在细胞杀伤性T细胞或者自然杀伤性细胞来源的外泌体上,携带Fas配体、TRAIL、CD40配体等TNF家族蛋白,可诱导靶1细胞凋亡。
有报道称,胞外囊泡透射电镜测试服务,癌细胞中也可以释放装载着Fas配体或TRAIL等的外泌体,诱导免1疫细胞凋亡,使癌细胞免受免1疫细胞的攻击。一般情况下,TNF家族蛋白以膜结合形式产生,被膜型金属蛋白酶切割后转变为可溶性蛋白。膜结合蛋白主要担负诱导细胞凋亡的功能,但可溶性蛋白的活性较弱。
外泌体不仅含有蛋白质抗原,还含有分泌细胞来源的mRNA或non-coding RNA(特别是miRNA),其功能引起广泛关注。外泌体的脂质双分子层膜可保护这些RNA,不被RNase分解,在血液、体液中稳定存在。在外泌体及其分泌细胞中均可检测出RNA,也存在仅能在其中之一检测出RNA的情况,因此我们设想存在一种可以选择性将特定的RNA吸收至外泌体的机制。
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