病理切片的制作步骤注意事项:切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
组织片贴附,应在除去标签位置后玻片的中间,各块组织的方向应一致。
封固前必须经酒精充分脱水,二甲1苯透明,湿封。
封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚。
取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。
切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
切片是制片技能中要求很高的步骤,即使同一蜡块,使用同一台切片机,不同的操作者也会切出不同质量的片子。
保存条件:室温干燥保存,一年内有效。
使用说明:
封片方法很简单,在载玻片中央滴2-3 滴树胶液(注意要滴在-起否则容易有气泡),然后把盖玻片慢慢放上去,轻轻挤压,树胶液会向外侧扩散至整个镜片,通风晾几个小时后用棉球粘上透明剂或者把镜片边缘多余的树胶擦洗干净。然后再放在通风处晾干,封片可常温保存。
注意事项:
透明剂有毒,避免与皮肤或眼睛接触。HE病理片子全景扫描提醒:封片时请注意通风。中性树胶透明度高,几乎和光学玻璃一样清晰,不腐蚀玻璃,因糨它是中性的,而玻璃怕碱性,如果不放心的可以在粘合以前用盐酸酒精泡泡晾干再粘可能会更好哦。
HE病理片子全景扫描
常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,植物石蜡切片,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。
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