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PCR实验室的主要特点:由于疫情的特殊情况,核酸检测任务大幅度增加,各地对移动PCR实验室需求猛增;有关移动PCR实验室的建设,必须严格按照一般PCR实验室的标准,但移动PCR实验室有其自身的特殊性。移动PCR实验室空间有限,又在户外使用。所以,在保证满足基本条件外,对空调及新风机组有特殊的要求,个别PCR移动实验室按照普通的PCR实验室建设,造成不良的工作环境,工作人员的舒适性受到了很大的影响。
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PCR实验室各区功能及主要设备:试剂准备区:主要进行试剂的制备,PCR实验室工程,分装和主反应混合液的制备。试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。
样品制备区:主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。 本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。
扩增区:主要进行DNA扩增项目。已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。
扩增产物分析区:主要进行扩增产物的测定。本区主要设备有加样器,、和水浴箱等。本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?常见的三区是指:
1、试剂配制区:PCR反应体系的配制区域。
2、标本处理区:包括扩增模板的制备,即提取DNA的地方。
3、PCR扩增和产物分析区:进行PCR扩增的区域,也是扩增产物进行凝胶电泳分析的区域。
如果将PCR扩增区域和产物分析区再次分开,就是四区隔离。四区隔离,主要目的是防止气溶胶在各个PCR区域之间的流动,好的方法是每个区域隔一幢楼,但操作起来不现实,于是便有了针对不同区域设置正负压的方法。
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