外泌体可通过多种小分子进行修饰,因此逐渐成为递送治1疗药1物的有效载体。研究发现,GRP78 在索拉菲尼耐药癌细胞中,相对于索拉菲尼敏感癌细胞中显著过表达,外泌体电镜测试服务,因此,可能是 HCC 治1疗的潜在靶点。
在这项研究中,锦州医学院赵亮课题组通过修饰 BM-MSCs 以表达外泌体 siGRP78,证明了 siGRP78 修饰的外泌体与索拉1非尼联合能够靶向肝细胞癌细胞中的 GRP78 并抑制其生长和体外癌细胞的侵袭。此外,siGRP78 修饰外泌体与索拉1非尼联合也抑制体内癌细胞的生长和转移。证明了 siGRP78 修饰的外泌体可以使索拉1非尼耐药的癌细胞对索拉1非尼敏感并逆转耐药性。
1实验室采用Zetaview(品牌:Particle Metrix)进行外泌体浓度粒径测试服务。其方法即纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,外泌体电镜,结合Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一;相较于其他表征方式,NTA技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。Zetaview包含的微电泳技术,也可进行zeta电位的检测。
目前配备为488nm波长的激光器,且搭配对应的滤光片,可以测量荧光抗1体标记的外泌体。
国际细胞外囊泡学会(ISEV) 在2014年的提议,对于提取获得的外泌体,外泌体电镜技术服务,需要通过以下手段进行确认:
双层囊膜结构是外泌体重要标志之一,但普通光学显微镜难以观察到此种亚显微结构。而透射电子显微镜 (Transmission electron microscope, TEM) 分辨率可达0.1 ~ 0.2 nm,可将被观察物体放大至数百万倍,非常适合进行外泌体双层囊膜超微结构观测。
表观生物技术团队拥有丰富的外泌体电镜样本处理与鉴定经验,可为客户提供高质量外泌体TEM检测服务,获得样本中外泌体典型形态特征图片 (如图一)。
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