石蜡切片制作流程1.取材:取材必须新鲜,切取材料时刀要锐利避免挤压组织,一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2,取后立即投入固定液。
2.固定:固定剂为组织块体积的10~15倍,一般为4%的中性多聚甲醛,固定时长24小时。
3.脱水:70%酒精→85%酒精→90%酒精→95%酒精→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ(不同组织脱水时间不同)
4.透明:透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织
石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
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