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染色体原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽科技公司(查看)

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原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位,从而创造了原位杂交技术。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,特别是20世纪70年代末到80年代初,分子、质粒和噬菌体DNA的构建成功,为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。

原位杂交技术还在以下生物领域有应用:

生态学和环境科学:在生态学和环境科学领域,原位杂交,原位杂交技术可以用于研究生物与环境之间的相互作用。例如,通过标记特定基因的探针,可以检测环境中微生物种群的分布和变化,植物原位杂交,进而研究其对环境的影响和作用。

进化生物学:在进化生物学领域,原位杂交技术可以用于研究物种之间的遗传差异和进化关系。例如,染色体原位杂交,通过比较不同物种之间基因序列的差异,染色体荧光原位杂交,可以揭示物种之间的亲缘关系和进化历程。

原位杂交第三天

1)        用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。

2)        用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。

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