外泌体的生物学功能:1、首1次报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。
2、进一步的研究表明其功能包括排泄不必要的蛋白质和RNA等物质。
3、可促进生物体免1疫应答反应。
4、对凝血和血管生成其促进作用。
5、可通过化学信号参与癌细胞的转移。
6、在哺乳期的免1疫调节过程中起到重要的作用。
7、不仅参与触发下游信号传导,而且特异性靶向受体细胞和交换蛋白。
8、可提供特殊的核酸且起到运输功能。
9、作为细胞-细胞之间传递信息的重要分子。
10、在病毒和朊蛋白等多种病原体之间起着独1特的作用。
外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,质量如何?
现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,今天我们来看看外泌体的粒径分析。
外泌体粒径分析原理
外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle tracking Analysis, NT A),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。
透射电镜作为鉴定外泌体的金标准,一直是科锐诺生物主营的业务之一。透射电镜点分辨率可以达到0.1nm,非常适合用来观察外泌体类囊泡。客户只需要寄送新鲜或者冻存的外泌体样品,胞胞外囊泡zetaview检测,我们负责从制片到观察的全套检测服务。一个样品提供2个放大倍数,10-15张照片。检测周期为7个工作日。
在透射电镜基础上,用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点,同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得经典形态的外泌体,又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。
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