病理切片的制作步骤注意事项:切片刀必须锋利,用力均匀,切片厚度3—5微米。切片完整无污染,无皱褶。
胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片,数量不得少于8张。
组织片贴附,应在除去标签位置后玻片的中间,各块组织的方向应一致。
封固前必须经酒精充分脱水,二甲1苯透明,湿封。
封片时不得有气泡,不得有树胶外溢。
标签必须贴于玻片左侧,编号字迹必须清楚。
取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。
切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点。
切片是制片技能中要求很高的步骤,即使同一蜡块,使用同一台切片机,不同的操作者也会切出不同质量的片子。
贴片:切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理,但是切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。首先将连串的切片投入到44℃左右(视蜡的熔点而定,此温度适合熔点为59℃左右的石蜡)的温水浴中,这时切片都浮在水面上,由于表面张力的作用使切片自然展平,用镊子将切片分开,然后用防脱玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于60℃ 烤箱烤片2个小时即可。常见的生物切片,masson切片染色技术服务,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。
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