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胞外囊泡粒径及浓度检测-科锐诺(推荐商家)

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外泌体研究开展的如火如荼。不论是 SCI 文章的发表还是各类基1金的申请,外泌体相关研究表现都非常亮眼。外泌体提取后,研究人员面临的一个重要问题就是,我提取的是不是外泌体?如果是的话,质量如何?

现阶段,对外泌体进行鉴定主要有三种主流的方法:电镜、粒径和 Western blot 分析靶标物。之前我们已经对外泌体电镜进行了总结,今天我们来看看外泌体的粒径分析。

外泌体粒径分析原理

外泌体粒径分析方法为纳米颗粒跟踪分析(Nanoparticle tracking Analysis, NT A),其原理是对每个颗粒的布朗运动进行追1踪和分析,结合 Stockes-Einstein 方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NT A技术已被外泌体研究领域认可为外泌体表征手段之一。相较于其他表征方式,NT A技术的样本处理更简单、更能保证外泌体原始状态、检测速度更快。

据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径(Nanoparticle Tracking Analysis,胞外囊泡粒径及浓度检测, NTA)、蛋白标志物(Western Blot, WB)。

外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态,判断样本是否含有外泌体。

外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌体双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形),同时可测量外泌体大小。

检测平台:TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN

检测结果:三张透射电镜图片,尽可能体现完整的外泌体形态(如有)

检测周期:10-15个工作日

如果癌细胞来源的外泌体进入单核细胞,通过外泌体内所含的TGF-β或前1列腺素E2等的作用,单核细胞会被诱导分化为髓源性免1疫抑制细胞。髓源性免1疫抑制细胞释放出IL-10等各种免1疫抑制分子,抑制免1疫细胞活化或抑制T细胞的诱导,从而抑制抗肿1瘤免1疫。癌细胞通过利用抑制免1疫细胞攻击自身这一机制,进而促进癌1症的发展。

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