常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里,植物石蜡切片,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。
HE染色流程是什么,很多人都不知道,今天跟着小编一起来学习一下,切片的好坏直接影响疾病诊断的及时与准确性。因此一张高质量的HE染色切片,是实验室必须掌握的技术之一。HE染色目前在国内国外病理诊断上被
广泛采用,常规的染色方法。下面一起来看HE染色的基本顺序。一般切片的片子应在60-70度左右的烤箱中烘烤30分钟以才可以进行染色。总的来说是一个时间较长的过程。
1.样品制备
对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。2.样品固定 95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。3.染核 苏mu
素染液染色2-3min,自来水洗涤。4.分色 镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。 5.染胞质 浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。6.封片 吹干或自然晾gan细胞爬片后,中性树胶封片。
以上六点就是HE染色的基本步骤,大家可以参考一下哦
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