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BIOREADER 5000 E α（ELISPOT）的原理是什么呢
（一）原理：细胞受到刺激后局部产生细胞因子，被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后，再与生物素标记的二抗结合，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。
（二）ELISPOT与ELISA的区别
1.ELISA通过显色反应，在Microplate reader上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
2.ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。
3.由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏，BIOREADER 5000 E α厂家，能从20万～30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb，在研究者以刺激剂activation细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。
BIOREADER 5000 E α解决的问题
ELISPOT 分析仪的出现解决了以下问题：
哪些斑点是抗原特异性 T 细胞产生的（此斑点具有进一步分析价值），哪些是无关细胞产生的（此斑点没有 T 细胞研究价值）
斑点大小的意义
在对不同细胞因子计数和分析时，BIOREADER 5000 E α生产厂家，如何定义斑点MIN和MAX尺寸
如何从单个细胞基础上分析
实验accurate度有多高？如果一个细胞产生相似的细胞因子，在多大程度上会干扰分析结果？
几次重复实验才能使结果更有意义？
BIOREADER 5000 E α简介
随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 ， 使体外检测各种细胞因子及Antibody研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法（ ELISA ）检测体液中游离的细胞因子（ CK ）或Antibody，BIOREADER 5000 E α价格，但由于游离的循环Antibody或 CK 的半哀期不同，BIOREADER 5000 E α，使之在体液中不断的被代谢或与target organ结合，而不能确切的反映体内的Antibody及 CK 的水平。 80 年代，国外的科研工作者根据 ELISA 技术的基本原理，建立了体外检测特异性Antibody分泌细胞和 CK 分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术（ ELISPOT ）。因其具有较高的特异性和敏感性，目前正被国内外广泛应用，对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。
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