荧光原位杂交(FISH)技术具有以下优点:
可多重染色:利用不同的荧光染料标记不同的探针,可以实现多重荧光原位杂交,从而同时检测多个序列,提高实验效率了。
高度创新性和性:FISH技术不仅可以用于研究已知基因或序列的染色体定位,染色体原位杂交,还可以用于未基因或遗传标记及染色体畸变的研究,在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。
而是对完整的斑马鱼胚胎进行探针杂交及检测,从整体上把握探针的结合部位,然后对胚胎进行切片,以确定探针结合的具体位置。整胚原位杂交在斑马鱼分子生物学研究中是一种非常重要的实验方法,原位杂交的探针可以是同位素的探针,用自显影来检测;也可以是非同位素的探针,通过荧光或酶法予以检测。我们这儿所介绍的一种原位杂交的方法是通过后者,以标记探针,然后用酶联的方法进行检测。原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的核酸分子为探针,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。
可以检测cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。
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