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淀粉酶活力测定
实验原理
淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称,包括α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶和异淀粉酶。芽孢主要用来产生α-淀粉酶和异淀粉酶,其中α-淀粉酶又称淀粉1,4-糊精酶,能够切开淀粉链内部的α-1,4-糖苷键,将淀粉水解为麦芽糖、含有6 个葡萄糖单位的寡糖和带有支链的寡糖与DNS试剂共热呈阳性反应,产生红棕色;而异淀粉酶又称淀粉α-1,6-葡萄糖苷酶、分枝酶,此酶作用于支链淀粉分子分枝点处的α-1,6-糖苷键,长沙耐高温淀粉酶,将支链淀粉的整个侧链切下变成直链淀粉。通过发酵实验,我们可以以酶活为依据,初步估计发酵的jia时期和发酵终点。
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工作机理:淀粉,一种碳水化合物的高度聚合体,是由两个多聚糖,直链淀粉和支链淀粉构成的。淀粉的底物(像玉米淀粉)需要稳定的高温淀粉酶以产生较短链的糊精。而葡萄糖淀粉酶主要用于葡萄糖浆、高果糖浆和用于酒精生产的淀粉水解。淀粉酶(内α-1,4-葡萄糖淀粉水解酶),能够将淀粉水解成长短不一的糊精及少量的低分子糖类、葡萄糖和麦芽糖内切酶,从而使淀粉糊的粘度迅速下降。
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胰淀粉酶由以活性状态排入消化道,是重要的水解碳水化合物的酶,和唾液腺分泌的淀粉酶一样都属于α-淀粉酶,作用于α-1,4糖苷键,对分支上的α-1,6糖苷键无作用,故又称淀粉内切酶,其作用的适pH为6.9,可通过小球滤过,是唯1能在正常时于尿中出现的血浆酶。
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