石蜡包埋切片实验基本步骤主要有以下几步:
1、取材:新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整,将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。
2、脱水:将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-无水乙醇I 30min-无水乙醇II 30min-醇苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蜡I1h-蜡II1h-蜡III 1h。
3、包埋:将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框,待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20°冻台冷却,蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4、切片:将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片,片厚4μm。切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平,用载玻片将组织捞起,并放进60℃烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。
病理切片是组织切片的一种,把病变组织做成的切片就叫病理切片。世界上所有的生物都是由细胞构成,人也一样,人生病本质上就是病变组织或器1官构成的细胞发生病变,如果能观察到细胞的变化,就有可能从形态学上判断出疾病,从而进行病理诊断。
有时候医生仅从患者的临床症状体征难以确诊,即便通过辅助检查,比如影像学检查、生化检查,仍然难以判断出疾病,这时候可能需要进行病理诊断,进行确诊。特别是肿1瘤疾病,首先临床医生通过手术把病变组织切除,植物石蜡切片,送到病理科1室,病理医生再进行观察,把病变组成切成3-4μm厚的薄片,将薄片贴附在载玻片上,这种带有病理组织的薄片就是病理切片。病理切片做成以后再放到显微镜上进行观察,从显微镜上观察到细胞改变,就能判断出疾病类型,这就是做病理切片的意义所在。
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