在原位杂交过程中,需要使用标记的核酸探针,通常是在性核素或非性物质中标记的。这些探针可以通过不同的方式制备,原位杂交,例如从已知序列的DNA或RNA制备,或者通过使用生物信息学方法设计和合成新的探针。
在进行原位杂交时,染色体荧光原位杂交,细胞或组织需要固定在适当的支持物上,例如载玻片。然后,探针与细胞或组织中的DNA或RNA进行杂交,通常是在加热条件下进行的。接下来,通过洗涤和显影步骤去除未结合的探针和信号增强剂,染色体原位杂交,后用显微镜观察杂交信号的位置。
原位杂交:
原位杂交是指用特定探针定位、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法,通过把特点序列客隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的RNA探针,将探针和切片样品进行杂交,植物原位杂交,通过一系列显色方法,来确定RNA或者DNA表达区域;本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记,灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,GISH/ISH/FISH按照探针进行收费,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,GISH杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量大优惠!
原位杂交(In situ hybridazation)
固定
收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后换成,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)
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