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考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下,考马斯亮兰G-250染料与蛋白质疏水区结合,导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm,同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的BSA 与Bradford试剂混合,测量在595 nm处的吸收值,在建立由一系列稀释的BSA建立的标准曲线的情况下,蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色,da光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,玻璃水亮蓝厂家,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年Bradford建立,台州玻璃水亮蓝,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比Lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/mL,xaio可测2.5μg/mL蛋白质,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有G250和R250两种。其中考马斯亮蓝G250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,玻璃水亮蓝批发,所以可以用来对电泳条带染色。
亮蓝
亮蓝,又名食用蓝色1号(日本)、食用蓝色2号,属水溶性非偶氮类着色剂。分子式C37H34N2Na2O9S3,相对分子质量792.86。亮蓝为食用蓝色色素,属于人工合成色素,是由邻磺酸与N--N- (3-磺基苄基)-经缩合、氧化而制得的。属于偶氮类化合物。可在食品、药品、化妆品等行业中作着色剂用。食品行业中适用于糕点、糖果、饮料等的着色。
中文名称
亮蓝
性质
带有金属光泽的红紫色颗粒或粉末
特点
无臭,水溶液呈蓝色
别名
酸性艳蓝G
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基本介绍
中文名:亮蓝
别名:酸性蓝 90;酸性艳蓝G;亮蓝;考马斯亮兰G250;考马斯亮蓝G250;Brilliant Blue鍳;亮蓝G;考马斯亮蓝G-250生物染色剂
英文名:Acid Blue 90
化学式:C47H48N3NaO7S2
CAS号:6104-58-1
MDL:MFCD00012141
摩尔质量:854.02
外观:带金属光泽的深紫至青铜色颗粒或粉末
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亮蓝(Brilliant Blue FCF)别名为食用青色1号(日),是由苯jia醛邻磺酸与N-乙ji,N-(3-磺基苄基)-苯an缩合后氧化,利用现代的生物技术制成的食用合成色素。亮蓝是一种人工合成食用染料,外观为红紫色均匀粉末或颗粒,有金属光泽,无臭,亮蓝具有酸性染料的特性,能使动物纤维着色。易溶于水(18.7g/100mL,21℃),呈绿光蓝色溶液,溶于乙醇(1.5g/100mL,95%乙醇,21℃)、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定、色泽鲜艳、调色自然、着色力强、色调不易受PH值影响。
本品为有金属光泽,带红色的紫色粉末或颗粒,无臭味。易溶于水,呈绿色蓝色溶液 ,溶于乙醇、甘油、丙二醇。耐光、耐热性强。对柠檬酸、酒石酸、碱均稳定。
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