胞外囊泡NTA检测-科锐诺生物
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武汉科锐诺生物科技有限公司
- 主营业务:外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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外泌体(Exosome)指包含了复杂RNA和蛋白质的膜性囊泡,其直径在30-150nm左右。存在于所有生物体液中,包括血液、唾液、尿液、滑液、羊水、细胞培养液等。不论是正常细胞还是肿1瘤细胞,都能够产生外泌体。 外泌体富含胆固醇和鞘磷脂,具有脂质双分子层结构;此外,外泌体还含有蛋白质和核酸。不同细胞来源的外泌体中所含有的生物分子具有细胞种属特异性,其外泌体特异性与来源细胞相符合。
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外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分热门的领域。外泌体中有丰富RNA以及蛋白,其中RNA的种类包括miRNA,LncRNA,胞外囊泡NTA检测,mRNA等[1]。大量文献报道,这些RNA在细胞间的相互交流中发挥着巨大的作用。如,外泌体中miRNA可以调节下游细胞对胰岛素的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(ATM),并收集培养基中富含miR-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。miR-155可以结合Argonaut蛋白,并募集下游的目标mRNA,从而影响细胞对胰岛素的敏感性和对葡萄糖的耐受性[2]。此外,外泌体中的LncRNA可以调控下游细胞的转录水平[3],mRNA、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译
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NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝1对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝1对浓度。
因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选出外泌体单独进行计数;同理:也不能通过NTA所提供的粒径分布情况这个单一的指标判断所提取出的内容物就是外泌体;例如下图为常见的粒径浓度分布图,可以说明所提取的内容物是在外泌体粒径范围内,但是否为外泌体还需要结合其他方法综合验证,譬如:透射电镜、western blot等。
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