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考马斯亮蓝g-250染色法测定蛋白质含量与其他方法相比有什么优缺点
蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲ji橙、考马斯亮蓝、xiu甲fen绿和xiu jia酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。
考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,食用蓝色1号生产厂家,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈da光吸收,食用蓝色1号批发,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强,比色杯不洗干净会影响光吸收值,不可用石英怀测定
保存期为5年《食用添加剂应用质量标准》(GB2760-1996)中要求:亮蓝可用于果味型饮料(液、固态)、水果汁型饮料、碳酸饮料、配制酒、糖块、点心上彩装、红绿丝、水果罐头、浓缩汁、青梅、对虾片,使用量为0.025g/kg;冰激凌,使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可翻倍;果味粉添加剂添加量按稀释液倍率的50%添加【使用说明】将规范称重的本产品放置器皿中,慢慢添加适量温开水,并持续拌和使之融解,个人所得水溶液就可以用于上色。应用全过程中应留意尽量减少或降低酸、碱、y化剂、氧化剂、金属材料电离、微生物等化学物质的影响,并留意防止受高溫与曝晒,上海食用蓝色1号,防止退色或变色。
使用量:一般为0.025g/kg。
.使用方法:将准确称量的本品置于容器中,逐渐加入适量温水,并不断搅拌使之完全溶解,所得溶液即可用于着色。
使用过程中应注意避免或减少酸、减、氧化计、还原计、金属离子、微生物等物质的不良影响,并注意免受高温与暴晒,以防褪色或变色。
复合着色剂的使用:根据需要,可将本品与本公司生产的其它色泽的着色剂按适当比例配置各种不同的颜色。
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